BUNSEN本生—elisa實驗中抗原抗體具體反應(yīng)

　　抗原抗體具體反應(yīng)之可逆性

　　Ag·Ab 的解離程度與K 值有關(guān)。高親和力抗體的抗原結(jié)合點與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合，兩者結(jié)合牢固，不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性，因此可用親和層析法來提純抗原或抗體。

　　在抗血清中，特異性的IgG 抗體僅占總IgG 中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體，稱為親和層析純抗體，應(yīng)用于免疫測定中可得到更好的效果。

　　抗原抗體具體反應(yīng)之適比例

　　在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復(fù)合物(沉淀)的量見圖1-4。曲線的高峰部分是抗原抗體比例*合適的范圍，稱為等價帶(zone of equivalence )。

　　在等價帶前后分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶。

　　如果抗原或抗體極度過剩，則無沉淀物形成，在免疫測定中稱為帶現(xiàn)象(zone phenomenon )?？贵w過量稱為前帶(prezone)，抗原地過量稱為后帶(postzone)。

　　在用免疫學方法測定抗原時，應(yīng)使反應(yīng)系統(tǒng)中有足夠的抗體量，否則測得的量會小于實際含量，甚至出現(xiàn)假陰性。

　　抗原抗體具體反應(yīng)之特異性

　　抗原抗體的結(jié)合實質(zhì)上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點之間。由于兩者在化學結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補關(guān)系，所以抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。

　　例如乙肝病毒中的表面抗原( HBsAg )、e 抗原(HBeAg)和核心抗體(HBcAg)，隨來源于同一病毒，但僅與其相應(yīng)的抗體結(jié)合，而不與另外兩種抗體反應(yīng)。

　　抗原抗體反應(yīng)的這種特異性使免疫測定能在一非常復(fù)雜的蛋白質(zhì)化合物(例如血清)中測定某一特定的物質(zhì)，而不需先分離待檢物。

　　但是這種特異性也不是的，假使兩種化合物有著部分相同的結(jié)構(gòu)，在抗原抗體反應(yīng)中可出現(xiàn)交叉反應(yīng)。例如：絨毛膜促性腺激素( hCG)和黃體生成激素(LH)均由α和β兩個亞單位組成，其結(jié)構(gòu)的不同處在β亞單位，而兩者的α亞單位是同類的。

　　用hCG 免疫動物所得的抗血清中含有抗α-hCG 和抗β-hCG 兩種抗體，抗α-hCG 抗體將與LH 中的α酶位發(fā)生交叉反應(yīng)。在臨床檢驗中，如用抗hCG 抗血清作為診斷試劑檢定尿液中hCG，只能用于hCG 濃度較高的試驗，否則婦女生理性排泄入尿液中的微量LH 將與之發(fā)生交叉反應(yīng)。

　　因此在作為早孕診斷(敏感度應(yīng)達到50mIu/mlhCG )的實際中必須應(yīng)用只對hCG 特異的抗β-hCG，以避免與其它激素的交叉反應(yīng)的發(fā)生。

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