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人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒檢測原理
BS-0033 人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒的檢測原理主要基于?雙抗體夾心法?的酶聯免疫吸附實驗(ELISA)?。以下是本生其核心步驟和原理的詳細說明:
檢測原理概述
抗體包被?:將高親和力的抗人IFN-γ單克隆抗體預先包被在微孔板的PVDF膜或孔內?。
抗原結合?:加入待測樣本(如血清、細胞上清液等),樣本中的IFN-γ會與包被抗體特異性結合?。
檢測抗體孵育?:加入生物素標記的抗IFN-γ檢測抗體,形成“包被抗體-IFN-γ-生物素化抗體"復合物?。
酶聯顯色?:加入酶(如HRP)標記的親和素,通過生物素-親和素的高親和力結合,形成免疫復合物?。加入顯色底物(如TMB)后,酶催化反應產生顏色變化,顏色深淺與IFN-γ濃度成正比?。
結果分析?:用酶標儀測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣本中IFN-γ的濃度?。
關鍵特點
高靈敏度?:部分試劑盒低檢測限可達10–16pg/mL?。
高特異性?:僅與目標IFN-γ結合,與其他類似物無交叉反應?。
重復性好?:板內、板間變異系數通常小于10%?。
應用領域
免疫研究?:如疫苗效果評估、T細胞功能分析?。
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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